Istituzione di un protocollo ottimizzato per il metodo di microscopia elettronica Golgi basato sulla procedura di colorazione Golgi-Cox utilizzando un kit commerciale . L’introduzione del kit FD Rapid GolgiStain ha permesso a molti ricercatori di studiare facilmente la morfologia dei neuroni. Grazie al metodo di impregnazione Golgi-Cox migliorato, con questo kit è possibile ottenere immagini colorate di neuroni stabili e altamente sensibili. Per analizzare in dettaglio microstrutture come spine dendritiche e coni di crescita, abbiamo cercato di creare un metodo utile combinando la colorazione di Golgi-Cox e la microscopia elettronica (metodo Golgi-EM) in modo che il Kit preparato i campioni colorati sono adatti per l’uso nella ricerca di microscopia elettronica (EM).
I risultati di questo studio suggeriscono l’importanza della fase di legame della glutaraldeide nel metodo Golgi-EM. Qui presentiamo il protocollo consigliato per il metodo Golgi-EM che è disponibile per la microscopia elettronica ad altissima tensione e la microscopia elettronica a trasmissione. Siamo convinti che il nostro metodo Golgi-EM potrebbe diventare un metodo affidabile e valido che potrebbe contribuire a nuove scoperte nella morfologia neuronale.
Metodo Golgi-Cox modificato e altamente sensibile per l’impregnazione completa e stabile dei neuroni embrionali
Il kit FD Rapid GolgiStain ( FD NeuroTechnologies, Inc., Ellicott City, MD) è stato sviluppato utilizzando un metodo di impregnazione Golgi-Cox migliorato per fornire una colorazione stabile, sensibile e confortevole dei neuroni maturi. Tuttavia, questo metodo non può visualizzare chiaramente i neuroni embrionali. Abbiamo ulteriormente migliorato il metodo Golgi-Cox introducendo un ulteriore passaggio di legame dell’aldeide prima dell’impregnazione; in questo modo possiamo fertilizzare stabilmente e sufficientemente i neuroni del cervello fetale in modo che siano visibili anche i delicati rami degli alberi dendritici.
Colorazione Golgi-Cox di dendriti neuronali e spine dendritiche con il kit FD Rapid GolgiStain .
Il metodo Golgi-Cox è una delle tecniche più efficaci per lo studio della morfologia dei dendriti neuronali e delle spine dendritiche. Tuttavia, l’affidabilità e il lungo processo di colorazione di Golgi-Cox sono stati i principali ostacoli all’uso diffuso di questa tecnica. Per superare queste carenze e promuovere questa preziosa tecnica, abbiamo sviluppato il kit FD Rapid GolgiStain basato sul principio dei metodi descritti da Ramón-Moliner nel 1970 e Glaser e Van der Loos nel 1981.
Il kit migliora e semplifica notevolmente la tecnica del Golgi-Cox. Questo kit è affidabile per visualizzare i dettagli morfologici dei neuroni, consentendo l’analisi di vari parametri della morfologia dendritica, come la lunghezza e il modello dei rami dendritici e il numero, la forma e la dimensione delle spine dendritiche, sia nel cervello animale che dopo quello umano Morte. È disponibile un video tutorial di 40 minuti sul congelamento, la criosezione e la colorazione dei tessuti. © 2019 John Wiley & Sons, Inc.
Valutazione delle caratteristiche diagnostiche del kit diagnostico immunocromatografico rapido SD Biosensor Yellow Fever IgM in Ghana
La febbre gialla è endemica in Ghana e le epidemie si verificano a intermittenza. I predittori dell’infezione da virus della febbre gialla (YFV) non sono specifici, rendendo i sintomi clinici inaffidabili come unico criterio diagnostico. Un’accurata conferma di laboratorio dei casi sospetti di febbre gialla è quindi essenziale nei programmi di sorveglianza. La segnalazione dei risultati dell’ELISA IgM da parte dei laboratori può subire ritardi a causa dell’arrivo tardivo dei campioni dai siti di raccolta e della disponibilità limitata dei kit ELISA.
- Questo studio ha valutato le caratteristiche diagnostiche del kit standard Q Yellow Fever IgM Rapid Immunochromatography Test Kit (biosensore SD) per la diagnosi rapida dell’infezione da febbre gialla in Ghana. Un pannello di 275 sieri, inclusi 81 sieri positivi per YFV confermati e 194 negativi, è stato rianalizzato in questo studio utilizzando il kit IgM per febbre Q standard.
- Utilizzando il CDC/OMS Yellow IgM Capture ELISA come riferimento, la sensibilità, la specificità e l’accuratezza del kit standard per il test della febbre Q gialla erano rispettivamente del 96,3%, 97,9% e 97,5%. Il tasso di falsi positivi era del 5,1% e non è stata riscontrata alcuna reattività crociata quando il test standard Q per la febbre gialla è stato testato contro campioni positivi per dengue, malaria ed epatite B e C. Inoltre, la variabilità cross-reader e il tasso di nullità erano pari a zero.
- I risultati indicano che le prestazioni diagnostiche del kit standard siero o plasma IgM Yellow Q Fever sono paragonabili al rilevamento di IgM sieriche o plasmatiche di IgM sieriche mediante ELISA e possono essere utilizzati come kit diagnostico rapido point of care per rilevare le infezioni da YFV in condizioni endemiche le zone.
Prestazioni diagnostiche comparative di un nuovo kit di amplificazione isotermica tramite loop di trascrizione inversa (RT-LAMP) per il rilevamento rapido di SARS-CoV-2
Sebbene la reazione a catena della polimerasi della trascrizione inversa (RT-PCR) sia considerata il test standard per la diagnosi di laboratorio di SARS-CoV-2, sono state descritte diverse limitazioni di questo metodo. L’amplificazione isotermica tramite loop di trascrizione inversa (RT-LAMP) è un’analisi molecolare alternativa e ha il potenziale per superare alcuni inconvenienti intrinseci della RT-PCR. In questo studio, abbiamo valutato le prestazioni diagnostiche del nuovo test HG COVID-19 RT-LAMP. In questa analisi retrospettiva, un totale di 400 campioni nasofaringei residui di routine con risultati noti di RT-PCR sono stati testati utilizzando il test HG COVID-19 RT-LAMP.
I valori complessivi della sensibilità e specificità di HG COVID-19 RT-LAMP rispetto a RT-PCR erano 97,0% (IC 95%: 93,6-98,9%) e 98,5% (IC 95%: 95, 7-99,7% ). L’accordo tra i test era quasi perfetto ( κ = 0,96). La concordanza è stata eccellente nei campioni con carica virale elevata (soglia del ciclo <30). Il tempo mediano di positività su RT-LAMP è stato di 17 minuti. HG COVID-19 RT-LAMP è un kit diagnostico molecolare affidabile per il rilevamento di SARS-CoV-2 e le sue prestazioni sono paragonabili a RT-PCR. Tempi di consegna più brevi e la capacità di eseguire la diagnostica molecolare in condizioni point-of-care lo rendono un’opzione preziosa per le strutture prive di apparecchiature di laboratorio avanzate.
In questo studio, abbiamo fornito un’analisi morfologica quantitativa dettagliata dei neuroni spinosi medi (MSN) nello striato dorsale dei topi e determinato l’accordo di valori tra i tre gruppi di animali ottenuti in diversi set di esperimenti.
Gli alberi dendritici di 162 apparati Golgi Cox ( FD Rapid GolgiStain Kit ) impregnati con MSN da 15 topi adulti C57BL / 6 sono stati ricostruiti tridimensionalmente con il software Neurolucida e i parametri della morfologia dendritica sono stati confrontati tra i gruppi sperimentali. I parametri della lunghezza della ramificazione e del modello di ramificazione non hanno mostrato differenze statisticamente significative ed erano altamente coerenti tra i gruppi.
L’area media del soma neuronale variava da 160 μm2 a 180 μm2 e le cellule avevano 5-6 dendriti primari con quasi 40 segmenti per neurone. L’analisi di Sholl ha confermato la regolarità dei rami dendritici. La lunghezza totale dei dendriti era di circa 2100 µm, con una lunghezza media dei rami individuali (intermedi) di circa 22 µm e degli arti finali di circa 100 µm. Sebbene ogni gruppo sperimentale abbia seguito lo stesso rigoroso protocollo per la preparazione dei tessuti e la colorazione del Golgi, abbiamo riscontrato un’incoerenza nel volume del dendrite e nella superficie del soma.
Tali modifiche avrebbero potuto essere influenzate metodologicamente durante la procedura del Golgi, pur senza intaccare la lunghezza dei dendriti e la complessità dell’albero. Poiché l’attività neuronale influenza lo spessore dei dendriti, non si può escludere che l’incoerenza di volume osservata fosse correlata agli stati funzionali dei neuroni prima del sacrificio degli animali.
FD Hematoxylin Solution™ (double strength) |
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| PS104-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 259 EUR |
FD Luxol Fast Blue Solution™ |
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| PS109 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 249 EUR |
FD Cresyl Violet Solution™ (regular strength) |
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| PS102-1 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 186 EUR |
FD Cresyl Violet Solution™ (double strength) |
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| PS102-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 232 EUR |
FD Eosin Y Solution™ (regular strength) |
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| PS103-1 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 152 EUR |
FD Eosin Y Solution™ (double strength) |
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| PS103-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 194 EUR |
FD Methyl Green Solution™ (regular strength) |
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| PS105-1 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 180 EUR |
FD Methyl Green Solution™ (double strength) |
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| PS105-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 225 EUR |
FD Neutral Red Solution™ (regular strength) |
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| PS106-1 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 183 EUR |
FD Neutral Red Solution™ (double strength) |
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| PS106-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | 228 EUR |
FD Azure II Solution™ (regular strength) |
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| PS107-1 | FD Neurotechnologies | 500 ml | Ask for price |
FD Azure II Solution™ (double strength) |
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| PS107-2 | FD Neurotechnologies | 500 ml | Ask for price |
FD Apop™ Kit |
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| PK101 | FD Neurotechnologies | kit | 712 EUR |
FD NeuroApap™ Kit |
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| PK201 | FD Neurotechnologies | kit | 823 EUR |
Control Sections for FD NeuroSilver™ Kit |
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| PCS101 | FD Neurotechnologies | each | 58 EUR |
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (frozen) |
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| PCS102- | FD Neurotechnologies | each | 73 EUR |
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (paraffin) |
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| PCS102-1 | FD Neurotechnologies | each | 67.03 EUR |
Control sections for FD NeuroApop™ Kit (frozen) |
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| PCS102-2 | FD Neurotechnologies | each | 67.12 EUR |
FD NeuroSilver™ Kit II (for 300 sections) |
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| PK301 | FD Neurotechnologies | kit | 792 EUR |
FD NeuroSilver™ Kit II (for 150 sections) |
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| PK301A | FD Neurotechnologies | kit | 658 EUR |
FD-838 |
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| TBP04351 | ChemNorm | 5mg | 1202 EUR |
Notoginsenoside Fd |
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| TBZ2386 | ChemNorm | 20mg | Ask for price |
Protein Stain-EZG Rapid Coomassie Blue Stain Solution |
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| BSP041 | Bio Basic | 1KIT, 10prep | 76.1 EUR |
Rapid Transformation Kit |
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| 156 | AthenaES | Kit | 158 EUR |
Rapid RCA Assay Kit |
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| VPK-111 | Cell Biolabs | 30 assays | 537 EUR |
Rapid RCA Assay Kit |
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| VPK-111-5 | Cell Biolabs | 5 x 30 assays | 2155 EUR |
NDV rapid test kit |
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| RG15-03 | Bionote | 1 box | 139.05 EUR |
Rapid Antibody Purification Kit |
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| AKR-160 | Cell Biolabs | 10 assays | 519 EUR |
Melamine Rapid Test Kit |
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| abx092011-50tests | Abbexa | 50 tests | 370 EUR |
Immuno Diluent and Block (Clear Solution), 1 Litter |
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| NB307-C-1L | Innovex | 1 Litter | 1772 EUR |
Frit Kit |
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| FRIT-KIT | Next Advance | 1each | 124 EUR |
Column Packing Kit |
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| PACK-KIT | Next Advance | 1pack | 1035 EUR |
Rapid Plant RNA Isolation Kit |
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| PT4191 | Bio Basic | 50Preps | 79.69 EUR |
Rapid Fungal RNA Extraction Kit |
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| FT71416 | Bio Basic | 50Preps | 79.69 EUR |
Canine T4 Rapid ELISA Kit |
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| DEIA1763 | Creative Diagnostics | 32T | 832 EUR |
Sterling Rapid Silver Stain Kit |
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| NAT1106 | National Diagnostics | 1KIT | 221 EUR |
Rapid Viral RNA Extraction Kit |
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| VT4184 | Bio Basic | 50Preps | 153.53 EUR |
Rapid Leishmania Ab Test Kit |
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| RB2104 | Bionote | 1 box | 127 EUR |
Rapid PED Ag Test Kit |
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| RG14-01 | Bionote | 1 box | 159.9 EUR |
Rapid Bacteria RNA Isolation Kit |
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| BS8625 | Bio Basic | 50Preps | 79.69 EUR |
Rapid Blood RNA Isolation Kit |
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| BT4182 | Bio Basic | 10Preps | 81.97 EUR |
Rapid Blood RNA Isolation Kit |
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| BT4183 | Bio Basic | 50Preps | 164.19 EUR |
Rapid Blood RNA Isolation Kit |
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| BT4184 | Bio Basic | 250preps | 506.75 EUR |
Melamine (MEL) Rapid Test Kit |
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| abx092057-50tests | Abbexa | 50 tests | 370 EUR |
Clenbuterol (CLE) Rapid Test Kit |
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| abx092058-50tests | Abbexa | 50 tests | 244 EUR |
Ractopamine (RAC) Rapid Test Kit |
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| abx092059-50tests | Abbexa | 50 tests | 244 EUR |
Salbutamol (SAL) Rapid Test Kit |
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| abx092060-50tests | Abbexa | 50 tests | 244 EUR |
Tetracycline (TCs) Rapid Test Kit |
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| abx092063-50tests | Abbexa | 50 tests | 398 EUR |
Sulfonamides (Sas) Rapid Test Kit |
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| abx092064-40tests | Abbexa | 40 tests | 398 EUR |
Quinolones (QNs) Rapid Test Kit |
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| abx092065-40tests | Abbexa | 40 tests | 398 EUR |
Ciprofloxacin (CPFX) Rapid Test Kit |
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| abx092066-50tests | Abbexa | 50 tests | 398 EUR |
Quinolones (QNs) Rapid Test Kit |
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| abx092067-40tests | Abbexa | 40 tests | 398 EUR |
Brucella Antibody Rapid Test Kit |
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| abx092069-40tests | Abbexa | 40 tests | 356 EUR |
Rapid Monoclonal Isotyping Kit (OKRA00052) |
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| OKRA00052 | Aviva Systems Biology | 1 each | 805 EUR |
H. Pylori Rapid Stain Kit |
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| AYH-1 | ScyTek Laboratories | 1 kit(s) | 215 EUR |
H. Pylori Rapid Stain Kit |
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| AYH-2 | ScyTek Laboratories | 100 Slides | 132 EUR |
ToxOut? Rapid Endotoxin Removal Kit |
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| K2501-5 | Biovision | 262 EUR | |
PCR Mycoplasma Detection Kit |
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| M034-Kit | TOKU-E | Kit | 266 EUR |
Goat anti-Human IgG (Fd) Antibody |
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| abx401522-05mg | Abbexa | 0.5 mg | 411 EUR |
M13 + fd + F1 Filamentous Phages antibody |
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| 10R-M101a | Fitzgerald | 500 ug | 943 EUR |
M13 + fd + F1 Filamentous Phages antibody |
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| 10R-M101ax | Fitzgerald | 100 ug | 392 EUR |
M13/fd/F1 Filamentous Phages antibody |
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| 10R-2437 | Fitzgerald | 5 mL | 286 EUR |
YB Rapid Ligationkit |
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| FYC003-100R | Yeastern Biotech | 1 vial | Ask for price |
Calci-Clear Rapid |
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| NAT1318 | National Diagnostics | EACH | 75 EUR |
Calci-Clear Rapid |
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| NAT1320 | National Diagnostics | EACH | 128 EUR |
Calci-Clear Rapid |
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| NAT1322 | National Diagnostics | EACH | 386 EUR |
Cobalt Rapid Run |
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| 6CoRR-100 | ABTBeads | 100 ml | 431 EUR |
Cobalt Rapid Run |
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| 6CoRR-25 | ABTBeads | 25 ml | 166 EUR |
Cobalt Rapid Run |
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| 6CoRR-500 | ABTBeads | 500 ml | 1474 EUR |
Nickel Rapid Run |
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| 6NiRR-100 | ABTBeads | 100 ml | 431 EUR |
Nickel Rapid Run |
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| 6NiRR-25 | ABTBeads | 25 ml | 166 EUR |
Nickel Rapid Run |
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| 6NiRR-500 | ABTBeads | 500 ml | 1474 EUR |
BASU RaPID plasmid |
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| PVT14054 | Lifescience Market | 2 ug | 599 EUR |
Fixation/Permeabilization Solution Kit |
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| 20-abx290028 | Abbexa |
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Sodium Pyruvate Solution, 100 mM Solution |
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| CCM1753-100 | Bio Basic | 100 mL | 60.84 EUR |
Stop Solution |
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| F006 | Cygnus Technologies | 12 ml | 180 EUR |
DTT Solution |
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| R-1104 | EpiGentek | 1 ml, 500 mM | 109.45 EUR |
Denaturing solution |
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| DE540 | Bio Basic | 1L | 61.31 EUR |
AlphaBioCoat Solution |
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| AC001 | Neuromics | 20 ml | 271 EUR |
TRIMMING SOLUTION |
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| 99-676-CM | CORNING | 1 L /pk | 88 EUR |
Schiff's Solution |
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| SRF030 | ScyTek Laboratories | 30 ml | 64 EUR |
Schiff's Solution |
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| SRF250 | ScyTek Laboratories | 250 ml | 77 EUR |
Schiff's Solution |
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| SRF3800 | ScyTek Laboratories | 1 Gal. | 345 EUR |
Schiff's Solution |
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| SRF500 | ScyTek Laboratories | 500 ml | 103 EUR |
Schiff's Solution |
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| SRF999 | ScyTek Laboratories | 1000 ml | 149 EUR |
Tartrazine Solution |
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| TZQ125 | ScyTek Laboratories | 125 ml | 64 EUR |
Tartrazine Solution |
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| TZQ500 | ScyTek Laboratories | 500 ml | 98 EUR |
Tartrazine Solution |
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| TZQ999 | ScyTek Laboratories | 1000 ml | 127 EUR |
Le analisi complete della complessità degli alberi e delle lunghezze dei dendriti fornite qui possono servire come strumento aggiuntivo per comprendere la variabilità morfologica nella popolazione più abbondante di neuroni striatali. Come parametri di riferimento, possono costituire la base per il confronto con i risultati ottenuti in studi che utilizzano diversi modelli di topi geneticamente modificati per spiegare le diverse condizioni patologiche in cui sono presenti MSN.